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◆ 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)

服务内容

1. 温和条件下进行蛋白抽提,BCA定量,调整蛋白浓度

2. 样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育

3. 样品与IP抗体进行孵育

4. 洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理

5. 沉淀产物SDS-PAGE或者WB鉴定(目前暂不提供别的鉴定)

6. Western blot检测

1) 电泳:聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE分离蛋白样品

2) 湿法印(BLOTINGTank Transfer

3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白INCUBATION: Antibody

4) 化学发光检测(ECL胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)

样品要求(样品处理及保存见附件)

1. 细胞>1×107;组织>30mg;细菌湿重50mg;植物100mg;血清50ul

2. 样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量500ug/样品

收费标准

服务项目

收费标准

实验周期

免疫沉淀

7500/基因

3-4

免疫沉淀+可曝光marker

7800/基因

3-4

ImageQuant TL读取条带IOD值及计算

 !

客户提供材料

1、 新鲜或正确保存的样品

2、 目的蛋白一抗

3、 阳性对照样品(尽量提供)

4、 相关文献(可选)

提交给客户结果

1、预实验曝光结果(胶片及扫描图),预实验采取2个一抗稀释度

2、正式实验曝光结果(胶片及扫描图)

3完整实验报告

4IOD值分析报告(可选)

5、抗体是否可以适用于IP是进行ChIP的前提

服务说明

1. 待检测样品可以是待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织等其他样品;

2. 免疫沉淀用抗体;

3. 检测用抗体;

4. 特异性二抗由天德悦(北京)生物科技有限责任公司提供;

5. IP检测可以不进行,但是不能保证后续实验的结果。

对照设置

1、 空白:无抗体,只有protein A/G

2、 阴性对照:无蛋白,有抗体及protein A/G

3、 阴性对照:未转染细胞或者基因敲除样品

4、 无关空白抗体

5、蛋白裂解液上清:Input

 

 

 

 

◆ 染色质免疫共沉淀Chromatin ImmunoprecipitationChIP

服务内容

1. 样品甲醛交联固定、终止、收集样品、裂解样品

2. 超声或者酶解处理样品DNA成片段,琼脂糖电泳检测

3. 样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育

4. 样品与IP抗体进行孵育

5. 洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理,提取DNA样品

6. 检测

1) 实时荧光定量PCR检测(最常用,免费检测)

2) DNA芯片检测(需要联系测试厂家,需要另付费。询价)

3) DNA产物测序(需要联系测试厂家,需要另付费。询价)

收费标准

服务项目

收费标准

实验周期

ChIP

15000/基因

3-4

实时荧光定量RT-PCR

免费

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